zui近,安全**被要求幫助評估干細胞實驗室是否存在安全隱患。雖然稱它為實驗室可能是個難題。那是一間經過改建的儲藏室,現在可容納大約十二個超低溫冰柜和六個半杜瓦瓶,其中包含用于填充冰柜的液氮。就像您想象的那樣,冷凍保存充滿了危險和嚴重的潛在危險。
冷凍保存已成為研究中發展zui快的*域之一,尤其是在醫療和保健*域。目的是存儲活細胞和細胞系的儲備,以便在需要時訪問遺傳材料。實際上,技術的進步使得能夠開發用于保存各種生物材料的技術,包括微生物,組織,原代細胞,已建立的細胞系,小型多細胞生物以及復雜的細胞結構(例如胚胎)以及核酸和蛋白質。只要保持低于-135°C的溫度,就可以將生物材料或細胞系以懸浮狀態無限期冷凍,基本上是停止時間。1個
當今使用的冷凍保存的主要方法是電冷凍器,液相氮冷凍器和氣相氮冷凍器。zui常用的方法是液氮蒸氣存儲。電冰柜的機械結構復雜,可提供zui高的存儲溫度,但仍需要備用液氮。液相氮冷凍機提供zui低和zui穩定的溫度,以及簡單性和機械可靠性。但是,交叉污染的風險和潛在的冷凍管感染2(稍后對此進行詳細介紹)存在嚴重的缺陷,這些缺陷使氣相液態氮冷凍機成為shou選方法。盡管這些方法簡單可靠,并且消除了交叉污染的風險,但它們會產生垂直溫度梯度,因此需要對液氮水平和溫度變化進行仔細而勤奮的監測,尤其是在上部區域。
氮氣似乎無害。畢竟,如果我們回想起中學時代的科學,地球大氣中78%是氮。它是一種無色,無味,無味且不可燃的氣體,比空氣輕(分子量為28,相比之下,給定或攝取的干燥空氣為28.96)。但是,正如我們不久將看到的,正是這些特性帶來了危險。
氮氣在-320°F沸騰;因此,液氮非常冷。接觸可能導致嚴重的凍傷,并可能凍結和粉碎某些物質。當它蒸發時,它膨脹了700倍。當壓力升高并超過容器材料的強度(請記住冷凍管)時,這可能導致密封容器爆炸。更重要的是,巨大的膨脹可能會在封閉,密閉或通風不良的空間中置換氧氣,從而產生潛在的威脅生命的窒息危險。結合其無色,無味,無味的特性,您可能不會意識到自己正陷入死亡陷阱。
現在,我們了解到液氮的主要危害是直接接觸,由于加壓而爆炸和氧氣置換。防止這些傷害并減少受傷機會的zui佳方法是培訓和適當的防護設備(個人和設施)。安全**強烈鼓勵在使用液氮的地方開發書面危害分析和標準操作程序。下面,我們將提供一些指導和建議,以幫助您正確地開始。
當進行冷凍保存和使用液氮時,zui嚴重的危害是潛在的窒息。當在容器之間轉移時(例如,從杜瓦瓶到冰柜或二級容器等),通過泄壓閥排放的液罐(杜瓦瓶),從泄漏閥以及從打開的容器(進入冷凍柜)轉移時,液氮會釋放并蒸發。確保您的設施或低溫保存區域具有足夠的機械通風。將氧氣傳感器安裝在呼吸區高度附近,并制定嚴格的維護計劃(氧氣傳感器必須經過校準,通常每兩年會磨損一次)。建議將警報設置點設置為18%,并將安全條件恢復到20%或更高。
防止直接接觸是下一個要解決的重要問題。shou先,只有經過培訓的人員才能使用液氮。確保始終可以使用適當的個人防護設備。至少應包括護目鏡和面罩,厚皮或低溫手套,實驗室外套,褲子和露趾鞋。解凍冷凍管或小瓶時,請將其放入厚壁的容器中或安全防護罩的后面。避免吸入蒸氣。僅使用批準的容器來運輸和運輸液氮。攜帶容器遠離身體和臉部。不要將容器打開或無人看管。
zui后,運輸和轉移液氮需要特殊的設備。以下是有關這些操作的更多準則: